Влияние электромагнитных полей на морфо-биологические параметры гидробионтов (на примере пресноводной креветки и тим и рязевской тиляпии )

На правах рукописи

ВАСИЛЬЕВА ЕКАТЕРИНА ГЕННАДЬЕВНА

ВЛИЯНИЕ ЭЛЕКТРОМАГНИТНЫХ ПОЛЕЙ НА

МОРФО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ

ГИДРОБИОНТОВ (НА ПРИМЕРЕ ПРЕСНОВОДНОЙ КРЕВЕТКИ И

ТИМИРЯЗЕВСКОЙ ТИЛЯПИИ)

Специальность 03.02.10 «Гидробиология»

А В Т О Р Е Ф Е Р А Т

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Астрахань – 2010

Работа выполнена на кафедре гидробиологии общей экологии ФГОУ ВПО «Астраханский государственный технический университет»

Научный руководитель:	кандидат биологических наук, доцент Мельник Ирина Викторовна
Официальные оппоненты:	доктор биологических наук, профессор Ревин Виктор Васильевич
	доктор географических наук
	Андрианов Владимир Александрович
Ведущая организация:	ГОУ ВПО «Дагестанский государственный университет»

Защита состоится «30» ноября 2010 г. в «12» часов на заседании диссертационного совета Д.307.001.05 при Астраханском государственном техническом университете, по адресу: 414025, Астрахань, ул. Татищева,16.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Астраханского государственного технического университета по адресу: 414025, Астрахань, ул. Татищева, 16.

Автореферат разослан «_____» __________ 20__г.

Ученый секретарь

диссертационного совета,

кандидат биологических наук Мелякина Эльвира Ивановна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Электромагнитные поля (ЭМП) в настоящее время считаются таким же по значимости компонентом биосферы, как воздух и вода, с той или иной интенсивностью они излучаются всеми материальными объектами (Бугримов, 2008). В результате индустриализации общества разнообразие антропо-генных источников ЭМП достигло беспрецедентного уровня. За последние 50 лет только мощность радиоизлучения объектов гражданского назначения увеличилась более чем в 500000 раз (Гетия, 2003; Сомов, Макаров и др., 2003). Еще в 1995 году ВОЗ был введен термин «глобальное электромагнитное загрязнение окружающей среды» и проблема была включена в перечень приоритетных для человечества (Re-pacholi, Greenebaum, 1998). Учеными мира ведутся многочисленные исследования как отрицательных, так и положительных эффектов влияния ЭМП на биологические системы (Чернова, Каплан, Арсланов, 2001; Binhi, 2001; Juuti1ainen J., Kum1in, 2006; Ляпунов, 2007).

В водной среде сильные поля появляются при работе электрорыбозаградителей, электролове рыбы, в ходе морской геофизической разведки, в результате работы мощных радиостанций, радиолокаторов, преобразователей электрической энергии и т. д. (Макаров и др., 2003, Бугримов, 2008). Гидробионты обладают высокой чувствительностью к различным характеристикам ЭМП. Такая электрочувствительность позволяет им получать биологически ценную информацию о фоновых и естественных электрических полях, об изменениях гидрометеорологических условий, ориентироваться в пространстве, находить добычу (Темурьянц, Владимирский, Тишин, 1992; Бурлаков и др., 1997, Burlakov et аl., 1997; Кадомская, Меньшикова, 2003).

Прогнозировать последствия возрастающего антропогенного воздействия ЭМП – это весьма сложная задача, поэтому изучение действия ЭМП на различные группы организмов представляется весьма актуальным. Крайне мало сведений о влиянии этого фактора на водные организмы, в том числе единичны исследования действия ЭМП на ракообразных (Степанюк, Баландина, 2007; Крылов, 2008) и рыб (Alexandrov, 1998; Сарапульцева, 2008).

С другой стороны повышенная чувствительность гидробионтов к воздействию ЭМП открывает широкие возможности применения ЭМ-терапии для стимуляции их жизненных функций. Всё чаще технологии биорезонансной терапии применяются в сельском хозяйстве и прудовом рыбоводстве. Но их применение требует высокого теоретического уровня знания в области воздействия ЭМП на живые организмы (Грудин, 1981; Магомедова, 2004).

Цель исследования: анализ степени воздействия высокочастотных (27 ГГц) и низкочастотных (5 Гц) электромагнитных полей на гидробионтов на примере тими-рязевской тиляпии (T. mossambica x T. nilotica) и пресноводной креветки (Neoca-ridina denticulate).

Задачи исследования:

1. Проанализировать влияние заданных ЭМП на эмбриональное развитие тимирязевской тиляпии и пресноводной креветки.

2. Оценить влияние ЭМП на результаты постэмбриогенеза тимирязевской тиляпии и пресноводной креветки.

3. Определить влияние ЭМП на рост молоди тимирязевской тиляпии.

4. Изучить изменения физиолого-биохимических показателей тимирязевской тиляпии при облучении ЭМП.

5. Дать оценку непрерывного воздействия высокочастотных и низкочастотных ЭМП на различные этапы онтогенеза тимирязевской тиляпии и пресноводной креветки.

Научная новизна работы.

В работе впервые изучено влияние высокочастотных и низкочастотных электромагнитных полей на икру тимирязевской тиляпии и пресноводной креветки. Дана оценка воздействия ЭМП на результаты эмбрионального и постэмбрионального развития обоих видов. Показан положительный эффект облучения при прохождении гидробионтами критических стадий.

Определено влияние высокочастотных и низкочастотных ЭМП на показатели роста и изменение суточных рационов питания тимирязевской тиляпии и пресноводной креветки. Выявлены изменения гематологических показателей и биохимического состава тела у тимирязевской тиляпии при облучении ЭМП.

Теоретическая и практическая значимость.

В диссертационной работе показано, что изменение морфометрических пока-зателей икры тиляпии и пресноводной креветки под влиянием ЭМП происходит за счет увеличения её обводненности (эффект гидратации), что положительным обра-зом отражается на выклеве личинок. Установлено, что повышение выживаемости личинок пресноводных креветок на стадии мизис под влиянием ЭМП происходит за счет снижения гетерогенности потомства и синхронизации роста гидробионтов.

Материалы диссертационной работы использованы для написания учебно-ме-тодического пособия «Влияние электромагнитных полей (ЭМП) на живые системы» для студентов специальностей 013100 «Экология» и 013500 «Биоэкология», а также могут применяться в учебном процессе по ряду прикладных дисциплин в области гидробиологии и экологии (электроэкологии).

Положения, выносимые на защиту.

1. Высокочастотное и низкочастотное ЭМП оказывают влияние на различные стадии эмбрионального и постэмбрионального развития гидробионтов.

2. Высокочастотное и низкочастотное ЭМП вызывают депрессию роста пресноводных креветок на протяжении всей личиночной стадии.

3. Длительное воздействие высокочастотного и низкочастотного ЭМП приводит к изменению физиолого-биохимических показателей молоди тимирязевской тиляпии.

4. Высокочастотное и низкочастотное ЭМП вызывают общие стрессовые реакции организмов на излучение, в большей степени выраженные в уменьшении потребления пищи и тиляпиями, и креветками.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы представлялись на следующих конференциях: IX Международной "Биологическое разнообразие Кавказа" (Махачкала, 2007), Международном научно-практическом симпозиуме "Современные наукоемкие технологии: теория, эксперимент и практические результаты", (Тула, 2007), Всероссийской научно-технической конференции "Современные проблемы экологии и безопасности" (Тула, 2007), X Международной научной конференции "Эколого-биологичекие проблемы бассейна Каспийского моря и водоемов внутреннего стока Евразии" (Астрахань, 2008), IV Международной научно-практической конференции "Человек и животные" (Астрахань, 2008), Всероссийской научно-технической конференции "Инновационные проекты в охране окружающей среды" (Тула, 2008), Международной научно-практической конференции "Электромагнитные поля в биологии – БИО-ЭМИ 2008" (Калуга, 2008), Первых международных Беккеровских чтениях (Волгоград, 2010), Международной научно-практической конференции "Охрана окружающей среды" (Белград, 2010), на научно-технических конференциях профессорско-преподавательского состава Астраханского государственного технического университета в 2006 – 2008 гг.

Публикации: По теме диссертации опубликовано 19 работ, из них 3 работы в журналах, включенных в «Перечень периодических изданий, рекомендованных ВАК РФ».

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературных данных, описания материала и методов исследования, собственных исследований, заключения, выводов, списка использованной литературы, включающего 230 источников, из которых 68 – зарубежных авторов.

Материал изложен на 159 страницах, содержит 17 таблиц, 31 рисунок.

1. Глава 1. Обзор литературы
2. Эколого-биологические аспекты влияния электромагнитного поля на живые организмы

В главе приводится обзор современных исследований о влиянии ЭМП на различные группы живых организмов, описаны основные теории механизмов воздействия фактора, изложены данные о практическом применении как положительных, так и отрицательных эффектов воздействия ЭМП при искусственном выращивании гидробионтов. Выявлена необходимость изучения степени воздействия ЭМП на водные организмы.

Глава 2. Материалы и методы исследования

Работа выполнялась на базе лабораторий кафедры гидробиологии и общей экологии Астраханского государственного технического университета в 2005 – 2009 годах. Объектами исследований служили пресноводные креветки (Neocaridina denti-culate var. red (Red cerri)) и тимирязевская тиляпия, являющаяся гибридом самки ти-ляпии мозамбикской и самца тиляпии нильской (T. mossambica x T. nilotica). Их изучение осуществлялось на различных стадиях развития – от икры до молоди (табл. 1).

Таблица 1

Количество использованного опытного материала

Объект	Стадия развития	Число экземпляров
Tilapia	икра	1250
	предличинки	937
	личинки	715
	молодь	500
N. denticulate	икра	1160
	личинки (стадия мизис: I, II, III)	464
	постличинки	174

Облучение исследуемых организмов проводили ЭМП с частотами в 5 Гц

(крайне низкие частоты) и 27 ГГц (радиоволны сверхвысоких частот – СВЧ). Высо-кочастотное электромагнитное поле характеризовалось величинами напряженности электрического поля – Е=20 В/м, напряжённости магнитного поля – Н=6,5 А/м; низ-кочастотное ЭМП – Е=90 В/м, Н=1,9 А/м. Облучение было непрерывным: для кре-веток – с момента оплодотворения икры до перехода на стадию постличинки (26 су-ток), для рыб – с начала вынашивания рыбой икры в ротовой полости до возраста 50 суток. При постановке опытов по облучению гидробионтов электромагнитным по-лем (ЭМП) использовалась методика Э.Б. Базановой, А.К. Брюховой, Р.Л. Виленской (1973). Наблюдения за термическим и гидрохимическим режимом в аквариумах проводили ежедневно с помощью прибора «Хориба» (иономер N – 8Г, Япония).

Оценка влияния низко- и высокочастотного ЭМП на опытные организмы осуществлялась с использованием морфометрических, физиологических, биохимических методов. Проведено 4 серии опытов с 5-тью повторностями.

Морфометрические методы. В результате исследований определялись общая длина и масса личинок креветок и мальков тиляпии (Правдин, 1966; Arielli, Rappo-port, 1981). Стадии развития личинок креветки определялись путем просмотра проб (10 экз.) под световым микроскопом (Hayashi, Hamano, 1984). Контроль за темпом роста личинок креветок проводился 2 раза в день, прирост тиляпии определялся каждые 10 суток (Винберг, 1965; Крупинский,1986; Вундцеттель, 2003).

Физиологические методы. Для выявления физиологического состояния рыб определялись коэффициент упитанности по Фультону, степень жирности по пяти-балльной шкале (Смирнова, 1960), индексы внутренних органов (Шварц и др., 1968; Шварц, 1980), некоторые гематологические показатели (число эритроцитов, содер-жание гемоглобина, скорость оседания эритроцитов, среднее содержание гемогло-бина в одном эритроците, процент различных стадий созревания эритроцитов, нали-чие патологических изменений) (Иванова, 1983; Селиверстов, 1999, Житнева, Пол-тавцева, Рудницкая, 1989; Tavares-Dias, 2000), а также рассчитывалась лейкограмма крови (Крылов, 1974; Иванова, 1983; Селиверстов, 1999; Ezzat, 1974). Для оценки интенсивности питания рыб и креветок определялось изменение суточных рационов кормления по абсолютной поедаемости корма. При этом суточный рацион корма для личинок рассчитывался раз в 10 дней. Вносимые пищевые компоненты взвеши-вались с точностью до 2 мг. Все условия питания, прежде всего качество пищи, бы-ли идентичны (Привезенцев, Власов, 2007; Хмелева, Гигиняк, Кулеш, 1988).

Биохимические методы. В ходе исследования определялось содержание сухо-го вещества икры креветок и рыб путем высушивания биопроб до постоянной мас-сы в сушильном шкафу и взвешивания на аналитических весах (Щербина, 1983), а также сухое вещество, белок, жир, содержание золы в теле молоди тиляпии (50 суток) согласно процедуре Association of Official Analytical Chemistry (1998). Белок в теле рыб определяли модифицированным методом Кьельдаля, содержание жира – по Фолчу (Folch et аll., 1957), золы – сжиганием органического вещества в муфельной печи при температуре 5500 С.

Статистическая обработка результатов исследований осуществлялась при по-

мощи интегральных пакетов STATISTICA v 6.0. В качестве показателя достоверно-

сти результатов использовался критерий Стьюдента (Лакин, 1990).

Глава 3. Влияние электромагнитного излучения на рыб (на примере

тимирязевской тиляпии)

3.1. Влияние ЭМП на качественные показатели икры тимирязевской

тиляпии

Изучение влияния электромагнитного излучения на оплодотворенную икру тимирязевской тиляпии выявило изменения её морфометрических показателей под воздействием высокочастотного ЭМП (27 ГГц) (табл. 2). В данной группе масса оп-лодотворенных ооцитов была на 5%, а диаметр на 7% выше контрольных значений. В группе, подвергнутой воздействию низкочастотного ЭМП, изменений морфомет-рических показателей икры по сравнению с контролем отмечено не было.

Таблица 2

Влияние электромагнитного излучении на икру тимирязевской тиляпии

Показатели	Характеристика икры и личинок
	Контроль		ЭМП (5 Гц)		ЭМП (27 ГГц)
	М±m		М±m		М±m
Сырая масса икринок, мг	2,3±0,05	0,12	2,3±0,03	0,10	2,4±0,03	0,10
Сухая масса икринок, мг	1,3±0,03	0,09	1,2±0,02	0,05	0,9±0,05*	0,11
Диаметр икринок, мм	4,0±0,05	0,13	4,0±0,06	0,15	4,2±0,05*	0,16
Выход предличинок, %	77±1,4	4,14	80±2,3	6,63	85±1,9*	5,12

*P<0,05 – различия достоверны в сравнении с контролем

Увеличение диаметра икринок в высокочастотном электромагнитном поле вызвано, в основном, повышением их обводненности. В проведенных экспериментах это подтверждается уменьшением процентных соотношений между сырой и сухой массой икринок в группе по сравнению с контролем. Сухая масса эмбрионов, подвергнутых воздействию высокочастотного ЭМП, составляла от 31 до 38% от сырой массы, тогда как в контроле и низкочастотном ЭМП данный показатель варьировал от 52 до 56 %, соответственно.

Подобные эффекты отмечали в экспериментах in vitro О. В. Бецкий и А. В. Путвинский (1986). Согласно результатам их исследований под действием высоко-частотного излучения во внутриклеточной и межклеточной жидкости возникает сложное конвективное движение, что снимает ограничения диффузного движения жидкости вблизи клеток и приводит к более активному переносу веществ, электри-ческих зарядов через мембраны, вызывая гидратацию белковых молекул. Описан-ные механизмы приводят к ускорению обменных процессов. В проведенных нами исследованиях это подтверждается увеличением процента выхода предличинок в высокочастотном ЭМП. При одинаковой плодовитости самок этот показатель в вы-сокочастотном поле составлял 83 – 85%, тогда как в контроле и низкочастотном по-ле он изменялся от 77 до 80%, соответственно.

Патологических изменений и аномалий в развитии зародышей при облучении обоими видами ЭМП выявлено не было. Во всех опытных вариантах, развитие эмбрионов осуществлялось по схеме, описанной А.П. Завьяловым (2001).

3.2. Влияние ЭМП на морфометрические показатели и выживаемость потомства тимирязевской тиляпии

Жизнестойкость молоди рыб во многом зависит от её размерно-весовых показателей (Привезенцев, Власов, 2007). Результаты проведенных нами исследований свидетельствуют об увеличении этих показателей у предличинок и личинок тимирязевской тиляпии под воздействием высокочастотного ЭМП (табл. 3). Наибольшее увеличение длины и массы по сравнению с контрольными значениями наблюдалось в высокочастотном ЭМП не только на стадии предличинки (5 суток) (масса – 6,5±0,04 мг; длина – 6,6±0,03 мм), но и на стадии личинки, перешедшей на активное питание (16 суток) (масса – 110,5±2,4 мг; длина – 8,9±0,04 мм). В низкочастотном ЭМП различия показателей для предличинок и личинок по сравнению с контролем не являлись статистически значимым (P>0,05).

Таблица 3

Влияние электромагнитного поля на потомство тимирязевской тиляпии

Показатели	Характеристика предличинок и личинок
	Контроль		ЭМП (5 Гц)		ЭМП (27 ГГц)
	М±m		М±m		М±m
Масса предличинок, мг	6,3±0,06	0,17	6,3±0,04	0,15	6,5±0,04*	0,17
Длина предличинок, мм	6,4±0,04	0,15	6,5±0,02	0,14	6,6±0,03*	0,15
Масса личинок, перешедших на активное питание, мг	90,1±1,5	2,2	95,2±1,7	2,5	110,5±2,4*	3,2
Длина личинок, перешедших на активное питание, мм	8,5±0,03	0,13	8,6±0,03*	0,15	8,9±0,04*	0,18

*P<0,05 – различия достоверны в сравнении с контролем

По результатам наших исследований воздействие высокочастотного ЭМП также положительно влияет на выживаемость предличинок тиляпии (выживаемость в высокочастотном ЭМП – 88%, в контроле – 77%, в низкочастотном ЭМП –75%). По нашему мнению и утверждению ряда авторов (Pauly, Munro, 1984; Majumdar, 1986; Mair et al., 1997), этот этап развития является критическим для тиляпии, характеризуется повышенной чувствительностью к воздействию внешних факторов и наибольшей элиминацией личинок.

3.3. Влияние ЭМП на рост и физиолого-биохимические показатели

молоди тимирязевской тиляпии

Результаты проведенных нами исследований показывают, что в группе рыб, подверженной высокочастотному ЭМП, динамика изменения удельной скорости роста значительно отличалась от таковой в других вариантах опыта (рис. 1).

Рис. 1. Средняя удельная скорость роста молоди тимирязевской тиляпии в опытных вариантах

Значения данного показателя были выше по сравнению с контролем в первые 20 суток (0,10 г/сут), в последующие 10 суток скорость роста резко снижалась (до 0,06 г/сут), но в дальнейшем рост усиливался, достигая максимальных значений на 40-е сутки (0,23 г/сут). Абсолютный прирост в этот период в высокочастотном ЭМП достигал 1,6 г/сут (низкочастотное ЭМП – 1,2 г/ сут, контроль – 1 г/сут). К 50-ым суткам скорость роста во всех группах устанавливалась на одном уровне, при этом масса рыб в высокочастотном ЭМП была выше и составила 28±3,8 г (в контроле достигала 18±1,5г, в низкочастотном ЭМП – 24±3,2 г). Коэффициент упитанности по Фультону по окончании облучения (50 суток) в опытных группах был ниже контрольных значений: на 15% в высокочастотном и на 35% в низкочастотном ЭМП.

Высокая энергия роста может быть реализована лишь в благоприятных условиях водной среды при оптимальном питании. Изучение суточного рациона питания рыб показало, что динамика данного показателя была схожа во всех 3-х опытных группах и представляла собой постепенное увеличение потребляемой пищи до 40-х суток, и ее снижение к 50-м суткам (табл. 4). В группах, подверженных облучению ЭМП, суточные рационы были гораздо ниже, чем в контроле в период с 10 до 40 суток. Наиболее выражена была разница в высокочастотном ЭМП. Пик потребления корма приходился на 40-е сутки (контроль – 45,0±1,9 г/сут; низкочастотное ЭМП – 55,0±3,9 г/сут; высокочастотное ЭМП – 65,0±1,3г/сут) и соответствовал наивысшим значениям скорости роста в этот период во всех группах.

Таблица 4

Изменение суточного рациона молоди тимирязевской тиляпии в опытных вариантах

Возраст, сут.	Суточный рацион (г корма на 1 особь в сутки)
	Контроль		ЭМП (5 Гц)		ЭМП (27 ГГц)
	М±m		М±m		М±m
10	2,2±0,13	0,12	2,0±0,12	0,11	2,0±0,16	0,13
20	2,2±0,15	0,13	2,0±0,21	0,12	2,0±0,18	0,14
30	14,4±0,2	0,35	9,0±0,22*	0,15	7,5±0,20*	0,15
40	45,0±1,9	2,10	55,0±3,9*	3,02	65,0±1,3*	3,17
50	21,2±2,2	1,82	22,5±2,8	2,20	22,0±3,5*	6,42

*P<0,05 – различия достоверны в сравнении с контролем

Согласно концепции С.С. Щварца (1968), любое изменение условий жизни животных (прямо или косвенно) неизбежно приводит к соответствующим морфофункциональным сдвигам. Изучение нами морфофизиологических индексов внутренних органов молоди тиляпии, проводившееся на 50-е сутки показало, что ЭМП способствует снижению показателя по отдельным органам (сердце, селезенка, почки) (табл. 5).

Таблица 5

Изменение индексов внутренних органов молоди тиляпии под воздействием ЭМП

Внутренние органы	Индексы внутренних органов тиляпии (%)
	Контроль		ЭМП (27 ГГц)		ЭМП (5 Гц)
	М±m		М±m		М±m
Сердце	0,8±0,05	0,12	0,6±0,04*	0,15	0,8±0,05	0,11
Печень	2,4±0,50	0,15	2,2±0,11	0,13	2,2±0,10	0,17
Селезенка	0,8±0,06	0,24	0,6±0,04*	0,18	0,8±0,07	0,21
ЖКТ	2,2±0,11	0,17	2,4±0,12	0,23	2,4±0,52	0,13
Почки	0,9±0,13	0,15	0,7±0,08*	0,31	0,6±0,09*	0,26

*P<0,05 – различия достоверны в сравнении с контролем

Индекс почек молоди тиляпии составлял в высокочастотном ЭМП – 0,7±0,08%, в низкочастотном ЭМП – 0,6±0,09%, в контроле – 0,9±0,13%. Так как основная функция почек заключается в выделении продуктов жизнедеятельности рыб, очевидно, что одной из причин снижения индекса является уменьшение интенсивности метаболических процессов в организме молоди тиляпии в ЭМП. Но, кроме того, головной отдел почки участвует в процессах кроветворения. У костистых рыб наиболее активно гемопоэз происходит в почках и селезенке, причем главным органом кроветворения являются почки (передняя часть). В почках и селезенке происходит как образование эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, так и распад эритроцитов. Достоверное уменьшение в высокочастотном ЭМП индексов почек на 23% и селезенки на 25% свидетельствует об угнетающем влиянии ЭМП на кроветворные функции.

В наших исследованиях было установлено наличие достоверных различий между группой, подверженной воздействию высокочастотного ЭМП и контролем по относительной массе сердца. Она составила в высокочастотном ЭМП – 0,6±0,04%, в контроле – 0,8±0,05%. Такие показатели объяснимы тем, что на фоне снижения уровня общего метаболизма сокращается потребление кислорода, замедляется ритм дыхания, снижается нагрузка на сердце (Аминева, Яржомбек, 1984).

В целом результаты таблицы 5 свидетельствуют, что индексы печени и желудочно-кишечного тракта мало зависят от воздействия ЭМП, тогда как индексы почек, селезенки, сердца, хотя и косвенно, указывают на снижение интенсивностей метаболизма. При этом различия индексов внутренних органов у рыб, находившихся в высокочастотном ЭМП, выражены сильнее, чем у молоди, облученной низкочастотным ЭМП.

Анализ биохимического состава тела рыб выявил, что воздействие высокочастотного ЭМП способствует увеличению доли влаги (высокочастотное ЭМП – 89,8±0,4%; низкочастотное ЭМП – 84,2±0,3%; контроль – 83,4±0,2%) и, как следствие, снижению количества сухого вещества (высокочастотное ЭМП – 10,2±0,3%; низкочастотное ЭМП – 15,8±0,1%; контроль – 16,6±0,1%), но при этом содержание сырого протеина, липидов и золы снижается на 38, 31 и 30%, соответственно (табл. 6). Следовательно, интенсивный прирост рыб в высокочастотном ЭМП был вызван повышением обводненности их тела.

Таблица 6

Изменение биохимического состава тела тиляпии под воздействием ЭМП

Показатели	Биохимический состав тела (%)
	Контроль		ЭМП (27 ГГц)		ЭМП (5 Гц)
	М±m		М±m		М±m
Влага	83,4±0,2	0,63	89,8±0,4*	0,75	84,2±0,3	0,71
Сухое вещество	16,6±0,1	0,37	10,2±0,3*	0,54	15,8±0,1	0,32
Сырой протеин	80,1±0,2	0,42	74,2±0,5*	0,81	80,2±0,3	0,68
Липиды	8,3±0,5	0,78	5,7±0,2*	0,48	7,8±0,2*	0,51
Зола	2,1±0,07	0,18	1,5±0,02*	0,07	1,8±0,04	0,10

*P<0,05 – различия достоверны в сравнении с контролем

Отмечено также, что во всех опытных группах ЭМП независимо от своих характеристик влияло на содержание в теле молоди липидов. Количество общих липидов в низкочастотном ЭМП снижалось на 6% по сравнению с контролем. Это связано со значительной лабильностью липидного обмена. Липиды служат для рыб основным источником энергии, являются важнейшими состав­ляющими клеточных мембран и ряда биологически активных соединений (Гершанович и др., 1991).

Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что высокочастотное электромагнитное поле оказывает негативное влияние на физиолого-биохимические показатели рыб, увеличивая их морфометрические параметры за счет повышения доли влаги в теле гидробионтов. Уменьшение процентного содержания органических веществ, а также снижение индексов некоторых внутренних органов (сердце, селезенка, почки), хотя и косвенно, свидетельствуют о снижении интенсивности метаболических процессов под воздействием высокочастотного ЭМП, что подтверждает концепцию А.С. Константинова (1997).

В целом, продолжение облучения до 50 суток приводит к выраженным стрессовым реакциям, вызывающим нарушение питания и изменение физиолого-биохимических показателей рыб.

Кровь, непосредственно участвующая в обменных процессах, отражает изменения, происходящие в организме животного. Результаты проведенных исследований показали, что ЭМП вызывало изменение основных гематологических показателей рыб (табл. 7).

Таблица 7

Некоторые показатели крови тиляпии

Показатели	Норма (Tavares-Dias, 2000)	Контроль	ЭМП (27 ГГц)	ЭМП (5 Гц)
Эритроциты (млн./мм3)	1,5 – 1,9	1,70±0,03	1,38±0,02*	1,47±0,02*
Гемоглобин (г/л)	68 – 110	64±0,91	54±0,85*	57±0,99*
СОЭ (мм/ч)	4,5 – 5,5	4,9±0,52	4,8±0,32	5±0,30
Загруженность эритроцитов (пг)	31 – 40	37,6±2,20	39,1±2,20	36,8±2,20
Молодые эритроциты (%)	2 – 5	2,3±0,20	2,7±0,50*	2,5±0,40
Лейкоциты (тыс./мм3)	24 – 37	35±2,40	37±3,20	33±2,70
Клетки с патологией (%)	3 – 6	5,4±0,44	4,8±0,36	5,2±0,48

*P<0,05 – различия достоверны в сравнении с контролем

Уровень гемоглобина в облученных группах был ниже по сравнению с контролем (высокочастотное ЭМП – на 18%, низкочастотное ЭМП – на 13%), и не соответствовал физиологической норме. Снижение содержания гемоглобина у молоди тиляпии было связано с уменьшением общего количества эритроцитов. В группах, подверженных воздействию как высокочастотного, так и низкочастотного электромагнитных полей, их количество достоверно уменьшалось на 15 и 11%, соответственно. Одной из причин снижения уровня гемоглобина являлось снижение интенсивности питания рыбами в условиях воздействия стрессового фактора (ЭМП).

Общее число клеток крови с патологиями достоверно не различалось во всех трех группах рыб, и соответствовало 4,8 – 5,5% от их общего числа, СОЭ колебалось от 4,8 до 5 мм/час. Количество молодых эритроцитов в периферической крови облученных рыб соответствовало физиологической норме, что является свидетельством активности эритропоэза.

Под влиянием ЭМП отмечены изменения и в лейкоцитарной формуле тиляпии (табл. 8). По нашим данным, в крови тиляпии определенная зависимость от ЭМП наблюдается в отношении лимфоцитов, моноцитов и нейтрофилов. При этом количество лимфоцитов закономерно повышалось до 86,5±0,8% при воздействии высокочастотного ЭМП и до 88,4±0,80% – низкочастотного ЭМП, по сравнению с контролем. Обратная картина наблюдалась в отношении моноцитов и нейтрофилов. Содержание моноцитов в высокочастотном и низкочастотном ЭМП уменьшалось на 12 и 27%; нейтрофилов – на 40 и 32%, соответственно. Содержание эозинофилов в опытных группах было ниже контрольных значений на 29%, и соответствовало нижней границе физиологической нормы. По данным лейкограмм наблюдали достоверное (p<0,05) перераспределение профиля в группах, подверженных воздействию ЭМП в сторону лимфофилии. Преобладал лимфоцитарный ответ на воздействие стрессового фактора.

Таблица 8

Лейкограмма крови тимирязевской тиляпии

Показатели, %	Норма (Tavares-Dias, 2000)	Контроль	ЭМП (27 ГГц)	ЭМП (5 Гц)
Лимфоциты	64-90	75,2±0,70	86,5±0,80*	88,4±0,80*
Моноциты	4,2-8,8	7,2±0,40	6,3±0,60*	5,2±0,30*
Эозинофилы	1,5-3,7	2,1±0,07	1,5±0,08*	1,5±0,07*
Нейтрофилы	1,6-15,5	15,3±1,81	8,8±1,75*	10,3±1,56*

*P<0,05 – различия достоверны в сравнении с контролем

В целом, изменение гематологических показателей молоди рыб следует связать с общими стрессовыми реакциями организма на излучение, что, в определенной степени, является свидетельством неудовлетворительного физиологического состояния рыб. Смещение гематологических показателей при этом происходит в сторону лимфофилии и выраженной моноцито- и нейтропении, а также снижения количества эритроцитов и гемоглобина.

Глава 4. Влияние электромагнитного излучения на пресноводных

креветок (Neocaridina denticulate)

4.1. Влияние ЭМП на качественные показатели икры N. denticulate

Изучение влияния электромагнитного излучения на икру пресноводных креветок показало, что наибольшей массой и диаметром обладали икринки особей, подвергнутых воздействию высокочастотного ЭМП (27 ГГц), как на начальной стадии дробления, так и на стадии пигментированных глаз (табл. 9).

Таблица 9

Характеристика яиц и эмбрионов креветок N. denticulate

Показатели	Характеристика яиц и эмбрионов
	Контроль			ЭМП (5 Гц)		ЭМП (27 ГГц)
	М±m			М±m		М±m
Яйцо на начальной стадии дробления
Сырая масса, г	0,12±0,006		0,017	0,12±0,007	0,021	0,14±0,005	0,015
Сухая масса, мг	0,06±0,003		0,012	0,06±0,002	0,010	0,08±0,003*	0,012
Размер, мм	0,65±0,007		0,023	0,65±0,005	0,014	0,68±0,004*	0,014
Эмбрион на стадии пигментированных глаз
Сырая масса, г	0,22±0,007		0,023	0,22±0,007	0,023	0,24±0,002*	0,010
Сухая масса, мг	0,04±0,003		0,012	0,04±0,002	0,010	0,04±0,006	0,022
Размер, мм	0,97±0,006		0,017	0,97±0,001	0,016	0,99±0,005*	0,014
Выход личинок, %	45±4,2		8,11	75±2,6*	6,93	84±2,2*	6,24

*P<0,05 – различия достоверны в сравнении с контролем

Механизм влияния ЭМП на яйца креветок подобен влиянию на икру рыб. Увеличение диаметра яиц и эмбрионов креветок объясняется, в основном, усилением их обводненности под действием высокочастотного ЭМП. Результаты наших исследований показали, что масса сырого вещества эмбрионов креветок, находящихся под воздействием высокочастотного ЭМП, на 6% выше, чем в контроле и низкочастотном ЭМП. При этом масса самок во всех группах не различалась.

Нами отмечалось достоверное повышение процента вылупившихся личинок у самок, подвергнутых воздействию обоих видов ЭМП. Выход личинок составлял от 70 – 80%. При одинаковой абсолютной плодовитости (100 – 150 икринок в кладке) и контролируемых параметрах среды во всех вариантах опыта численность личинок в

начале стадии мизис в высокочастотном ЭМП в 2 раза выше, чем в контроле, и в 1,15 – 1,2, чем в низкочастотном ЭМП.

4.2. Воздействие ЭМП на рост и выживаемость личинок креветок

N. denticulate

Период личиночного развития неокардин укороченный, состоял из 3 подстадий мизис (I,II,III). В контроле и в облучаемых группах развитие происходило по схеме описанной Hayashi, Hamano (1984). Наблюдения показали, что воздействие ЭМП в 5 Гц и 27 ГГц приводило к уменьшению массы личинок на подстадиях мизис II; III и размера на подстадии мизис III (табл. 10).

Таблица 10

Характеристика личинок креветок N. denticulate на стадии мизис

Показатели	Характеристика личинок
	Контроль			ЭМП (5 Гц)		ЭМП (27 ГГц)
	М±m			М±m		М±m
Личинка на подстадии мизис I
масса, мг	1,58±0,06		0,07	1,59±0,07	0,02	1,61±0,05	0,05
длина, мкм	5,5±0,3		0,02	5,5±0,2	0,01	5,5±0,3	0,02
Личинка на подстадии мизис II
масса, мг	2,12±0,05		0,04	1,73±0,04*	0,02	1,59±0,02*	0,01
длина, мкм	9,2±0,5		0,79	9,5±0,2	0,02	9,5±0,2	0,02
Личинка на подстадии мизис III
масса, мг	6,16±4,2		0,75	1,96±2,6*	0,48	1,95±2,2*	0,45
длина, мкм	15,5±0,4		0,25	9,5±0,2*	0,02	9,5±0,2*	0,02

* P<0,05 – различия достоверны в сравнении с контролем

На 1-ой подстадии масса и длина личинок статистически не различалась (P>0,05), но уже на следующем этапе онтогенеза при равных размерах масса личинок в группах, подверженных воздействию ЭМП, была на 20 – 25% ниже контрольных значений. На подстадии мизис III различия между опытными и контрольными группами усилились (высокочастотное ЭМП – размер – 9,5±0,2; масса – 1,95±2,2; низкочастотное ЭМП – размер – 9,5±0,2; масса – 1,96±2,6; контроль – размер – 15,5±0,2; масса – 6,16±2,2).

По результатам наших исследований во всех опытных вариантах отмечалась различная динамика изменения скорости роста личинок пресноводных креветок (рис. 2). Начальный этап личиночного развития в облученных группах подобен контрольному варианту и характеризуется снижением скорости роста (высокочастотное ЭМП – с 0,032 до 0,005 мг/сут; низкочастотное ЭМП - с 0,032 до 0,002; контроль – с 0,07 до 0,005 мг/сут) (подстадия мизис I). Низкий прирост массы тела после выклева связан с тем, что для личинок на начальной стадии развития характерно смешанное питание, и они получают энергию, в основном, за счет запасов эмбрионального желтка.

Рис. 2. Изменение средней удельной скорости роста личинок креветок N. denticulata под влиянием ЭМП

Начиная с 16 суток, в контроле отмечен активный рост личинок, связанный с полным переходом на экзогенное питание (мизис II), которое обеспечивает интенсивный прирост массы тела. Особи в облученных группах в этот период испытывали депрессию роста под воздействием обоих видов ЭМП. Подстадия мизис II в онтогенезе личинок Neocaridine является критической и по данным ряда авторов (Benzie, Silva, 1983; Shih, Cai, 2007), характеризуется минимальным уровнем всех основных пищеварительных ферментов. Данный временной интервал характеризуется и повышенной чувствительностью личинок ко всем внешним воздействиям. На наш взгляд угнетение роста особей на подстадии мизис II обусловлено усилением эффекта «ферментативного кризиса» под воздействием ЭМП.

На 18 сутки в контроле отмечается пик роста, который впоследствии сме-няется резким спадом. Организм креветок, достигая своего максимального размера, начинает подготовку к линьке (мизис III). К 20-ым суткам скорости роста во всех группах сравниваются и составляют 0,005 мг/сут. Отставаний в развитии и росте при переходе на следующую стадию у облученных особей не выявлено.

Определяющим фактором, влияющим на рост личинок, является полноценное питание. Изучение потребления корма личинками на стадии мизис в наших исследованиях свидетельствует о снижении суточных рационов в низкочастотном и высокочастотном ЭМП, которые были достоверно ниже по своим абсолютным значениям по сравнению с контролем (табл. 11). В высокочастотном ЭМП рационы варьировали от 0,16 до 0,19 мг/сут, в низкочастотном ЭМП от 0,14 до 0,15 мг/сут, а в контроле от 0,26 до 1,22 мг/сут. Снижение потребления корма креветками в опытах с ЭМП свидетельствует о выраженных стрессовых реакциях гидробионтов.

Таблица 11

Изменение суточных рационов креветок Neocaridine denticulate на стадии мизис

Возраст (сутки)	Суточный рацион (мг корма на 1 особь в сутки)
	Контроль		ЭМП (27 ГГц)		ЭМП (5 Гц)
	М±m		М±m		М±m
10	0,26±0,01	0,024	0,16±0,01*	0,008	0,14±0,01*	0,008
12	0,29±0,03	0,029	0,16±0,01*	0,009	0,14±0,01*	0,009
14	1,22±0,03	0,073	0,17±0,01*	0,008	0,14±0,01*	0,008
16	0,37±0,02	0,051	0,17±0,02*	0,010	0,14±0,01*	0,008
18	0,42±0,02	0,050	0,18±0,02*	0,010	0,15±0,01*	0,009
20	0,48±0,02	0,042	0,18±0,02*	0,010	0,15±0,02*	0,010
22	0,54±0,01	0,035	0,18±0,01*	0,009	0,15±0,03*	0,014
24	0,61±0,01	0,032	0,19±0,01*	0,009	0,15±0,02*	0,010

*P<0,05 – различия достоверны в сравнении с контролем

Одним из наиболее важных показателей роста личинок является изменение длины карапакса. От динамики этого показателя зависит линька, обеспечивающая соматический рост, а также размножение, освобождение от экзопаразитов и др. Результаты проведенных нами исследований показали, что в контроле с момента вылупления у личинок проявлялась неравномерность в росте карапакса и, как следствие, увеличение гетерогенности потомства (табл. 12).

Таблица 12

Изменение размера карапакса личинок N. denticulate на стадии мизис

Возраст (сутки)	Размер карапакса (мкм)
	Контроль		ЭМП (27 ГГц)		ЭМП (5 Гц)
	М±m		М±m		М±m
10	5,7±0,3	0,28	8,0±0,4*	0,01	8,0±0,4*	0,01
12	8,0±0,5	0,74	8,0±0,3	0,01	9,2±0,3	0,01
14	9,2±0,6	1,16	9,2±0,3	0,03	9,5±0,2	0,01
16	9,5±0,5	0,79	9,5±0,2	0,02	9,5±0,2	0,02
18	13,5±0,6	0,95	9,5±0,2*	0,03	9,5±0,2*	0,02
20	15,5±0,5	0,71	9,5±0,2*	0,03	9,5±0,2*	0,03
22	15,5±0,4	0,27	9,5±0,2*	0,02	9,5±0,2*	0,02
24	15,5±0,4	0,25	9,5±0,2*	0,02	9,5±0,2*	0,02

*P<0,05 – различия достоверны в сравнении с контролем

В контроле значения средних квадратичных отклонений исследуемого признака варьировали от 0,25 (26 суток) до 1,16 (16 суток). Гетерогенность особей резко увеличивалась к 14-м суткам и оставалась высокой до 24-х суток (окончание стадии мизис). С одной стороны, это обстоятельство снижало пищевую конкуренцию, с другой, способствовало отставанию в росте более мелких личинок, что, в конечном итоге, сказалось на их выживаемости. В опытных группах вариации среднего квадратичного отклонения не превышали 0,03, отмечалась синхронизация линек креветок, которая способствовала равномерному росту личинок и, как следствие, высокой их выживаемости. Уменьшение гетерогенности имеет большое значение при переходе на стадию постличинки, снижая риск каннибализма во время линек.

В целом, результаты исследований показали, что выживаемость в высокочастотном и низкочастотном ЭМП на протяжении всей стадии мизис была достоверно выше (P<0,05), чем в контроле (высокочастотное ЭМП – 82%, низкочастотное ЭМП – 74%, контроль – 43%). Следует отметить, что немаловажную роль в повышении выживаемости может также играть обеззараживание воды электромагнитными полями, отмеченное рядом исследователей (Реброва, 1992; Иголкина и др., 2004 и др.).

Таким образом, воздействие как высокочастотного, так и низкочастотного ЭМП оказывает значительное влияние на динамику роста и выживаемость личинок пресноводных креветок.

Заключение

Проведенные нами исследования показали, что ЭМП оказывает воздействие на тимирязевскую тиляпию на различных этапах онтогенеза (икра, предличинки, личинки, молодь), изменяя выживаемость, морфометрические, гематологические, морфобиологические, биохимические показатели. Продолжительное воздействие высокочастотного ЭМП (до 50 суток) приводит к значительному ухудшению физиологического состояния молоди тиляпии.

Влияние ЭМП на креветок рода Neocaridina неоднозначно, с одной стороны его воздействие приводит к увеличению выклева икры и выживаемости личинок на стадии мизис, синхронизации линек, но, с другой стороны, при этом снижается уровень потребления пищи, рост личинок угнетается. По этим причинам нельзя рассматривать влияние ЭМП на личинок креветок как положительное.

В целом, результаты исследований свидетельствуют о том, что облучение как высокочастотным, так и низкочастотным ЭМП влечет за собой последствия для всех стадий развития исследуемых организмов. Влияние высокочастотного ЭМП (27 ГГц) на исследованных гидробионтов выражено сильнее.

Выводы

1. Воздействие высокочастотного ЭМП (27 ГГц) вызывает увеличение массы и диаметра икры тимирязевской тиляпии и пресноводных креветок на 5 – 7% за счет усиления ее обводненности (эффект гидратации) и повышает выклев предличинок и личинок этих гидробионтов, в среднем, на 7% по сравнению с контролем.

2. Облучение икры пресноводных креветок низкочастотным ЭМП (5Гц) увеличивает выклев личинок на 30%, по сравнению с контролем, не влияя на морфометрические параметры оплодотворенных ооцитов.

3. Высокочастотное ЭМП способствует повышению жизнестойкости тимирязевской тиляпии на стадии предличинки и пресноводных креветок на стадии мизис, увеличивая выживаемость рыб на 20 %, креветок – на 35% по сравнению с контролем. Влияние низкочастотного ЭПМ на выживаемость отмечается только у креветок – она возрастает на 29% по сравнению с контролем.

4. Непрерывное воздействие высокочастотного и низкочастотного ЭМП угнетает рост креветок на протяжении всей стадии личиночного развития мизис, споссобствуя уменьшению гетерогенности личинок, синхронизации линек и, как следствие, высокой их выживаемости (выживаемость в 2 раза выше, чем в контроле).

5. Непрерывное воздействие высокочастотного ЭМП на молодь тимирязевской тиляпии в течение 50 суток приводит к увеличению ее массы в среднем на 7 – 10 г по сравнению с контролем за счет повышения обводненности тела.

6. Высокочастотное ЭМП оказывает негативное влияние на биохимический состав тела молоди тиляпии, уменьшая содержание белков на 38%, липидов – на 31%, золы – на 30%, при повышении доли влаги на 7%.

7. Хроническое воздействие высокочастотного и низкочастотного ЭМП вызывает достоверное смещение лейкоцитарного профиля молоди тимирязевской тиляпии в сторону лимфофилии (доля лимфоцитов увеличивается на 15%). Уровень гемоглобина в облученных группах при этом снижается по сравнению с контролем (в высокочастотном ЭМП – на 18%, в низкочастотном – на 13%) и не соответствует физиологической норме, что обусловлено уменьшением общего количества эритроцитов.

8. Непрерывное облучение высокочастотным и низкочастотным ЭМП влечет за собой последствия для тимирязевской тиляпии и пресноводных креветок на различных этапах онтогенеза, приводя к значительному ухудшению их физиологического состояния. Влияние высокочастотного ЭМП (27 ГГц) на исследованных гидробионтов выражено сильнее.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. *Васильева Е.Г. Разработка методологии оценки влияния электромагнитного излучения на живые организмы // Известия ТУЛГУ Серия Экология и рациональное природопользование выпуск 1.– Тула, 2006. – с.86 – 91.

2. Васильева Е.Г. Особенности приспособления модельных объектов к действию электромагнитных волн // Фундаментальные исследования в биологии и медицине: сборник научных трудов – Вып. 2 – Ставрополь, 2007. – с.197 – 199.

3. Васильева Е.Г. Использование моделирования и статистических методов для изучения влияния электромагнитного поля (ЭМП) на живые организмы // Информационные системы и модели в научных исследованиях, промышленности и экологии: всерос. науч.-техн. конф. – Тула, 2007. – с. 28 – 30.

4. Васильева Е.Г. Проблема биоэлектромагнитной совместимости живых систем и технических средств-источников электромагнитного поля // Современные проблемы экологии всерос. науч.-техн. конф. – Москва, Тула, 2007 – с.4 – 6.

5. Васильева Е.Г. Использование креветок N. denticulate для модельных экспериментов // Биологическое разнообразие Кавказа: мат. IX Межд. конф. Махачкала:

ИПЭ РД, 2007. – с. 292 – 294.

6. Васильева Е.Г. Разработка новых технологий культивирования нетрадиционных объектов аквакультуры // Современные наукоемкие технологии: теория, эксперимент и практические результаты: тезисы докл. междун. науч.-практ. симпозиума. – М.., Тула: Изд-во ТулГУ, 2007. – с.54 – 56.

7. Васильева Е.Г. Влияние электромагнитного излучения на ракообразных (на примере креветки N. denticulata) // Современные проблемы экологии и безопасности: доклады Всерос. научн.-техн. конф. – Тула: Изд-во ТулГУ, 2007. том 2 – с. – 25 – 27.

8. Васильева Е.Г., Мельник И.В. Электромагнитное загрязнение окружающей природной среды // Эколого-биологичекие проблемы бассейна Каспийского моря и водоемов внутреннего стока Евразии: мат. X междунар. науч. конф. - Астрахань: изд-во Астраханский университет, 2008. - с. 325 – 327.

9. Васильева Е.Г. Проблема выбора объектов для изучения воздействия ЭМП на гидробионтов. // Фундаментальные исследования в биологии и медицине: сборник науч. трудов – Вып. 4. – Ставрополь, 2008. – с.144 – 147.

10. *Василева Е.Г, Мельник И.В., Быстрякова Е.А. Совершенствование технологии выращивания тиляпий и их гибридов // Естественные науки. – №3(24). – Астрахань, 2008. – с.81 – 83.

11.Васильева Е.Г., Мельник И.В. Вопросы радиологической безопасности // Инновационные проекты в охране окружающей среды: доклады всерос. науч.-техн. конф. - Тула, 2008. – с.199 – 202.

12. Васильева Е.Г. Механизм влияния электромагнитных полей на живые организмы // Вестник АГТУ. –№3 (44). – Астрахань, 2008. – с.186 – 191.

13. Васильева Е.Г., Мельник И.В. Влияние электромагнитного поля на биологические объекты // Экология и медицинские проблемы: докл. всерос. науч.-техн. конф. – Тула: Изд-во ТулГУ, 2008. – С.42 – 45.

14. Васильева Е.Г., Мельник И.В. Влияние электромагнитного поля (ЭМП) на личиночное развитие пресноводной креветки N. denticulate // Электромагнитные излучения в биологии, БИО-ЭМИ – 2008: труды 4-ой межд. науч. конф. – Калуга: КГПУ им. К.Э. Циолковского, 2008. – с.83 – 87.

15. Васильева Е.Г., Мельник И.В. Влияние электромагнитного поля (ЭМП) на критические стадии развития пресноводной креветки N. denticulate // Биологическое разнообразие Кавказа: мат. межд. науч. конф. – Назрань: Пилигрим, 2008. – с. 195 – 197.

16. Васильева Е.Г., Мельник И.В. Некоторые аспекты влияния ЭМП на десятиногих ракообразных // Вестник АГТУ. – №1. – Астрахань, 2009. – с. 121 – 126.

17. *Мельник И.В., Быкова Е.Г., Быстрякова Е.А. Гематологические показатели тиляпии в условиях воздействия электромагнитного поля (ЭМП) // журнал «Естественные науки». – Астрахань, 2009. – №3 (28). – с. 123 – 125.

18. Васильева Е.Г., Быстрякова Е.А. Изменение показателей крови тиляпии под влиянием электромагнитного поля // Вестник АГТУ. – №1. – Астрахань, 2009. – с. 119 – 121.

19. Васильева Е.Г. Влияние электромагнитных полей (ЭМП) на рост и энергетический баланс пресноводных креветок // Первые междунар. Беккеровские чтения:

сб. науч. трудов по мат. конф. – Волгоград: ВолГУ, 2010. – с. 218 – 220.

* – статьи, опубликованные в журналах, рекомендованных ВАК РФ