Характеристика микробиоценоза репродуктивного тракта женщин при трихомонадной инфекции
На правах рукописи
ЧЕРКАСОВ Игорь Викторович
ХАРАКТЕРИСТИКА МИКРОБИОЦЕНОЗА РЕПРОДУКТИВНОГО ТРАКТА ЖЕНЩИН ПРИ ТРИХОМОНАДНОЙ ИНФЕКЦИИ
03.00.07 – «Микробиология»
14.00.01 – «Акушерство и гинекология»
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
кандидата медицинских наук
Оренбург - 2009
Работа выполнена в Государственном учреждении Институте клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения Российской академии наук
Научный руководитель: член-корреспондент РАН, академик РАМН,
Заслуженный деятель науки РФ,
доктор медицинских наук, профессор
БУХАРИН Олег Валерьевич
Официальные оппоненты:
| Доктор медицинских наук, ГОУ ВПО «Оренбургский государственный университет» | БРУДАСТОВ Юрий Авенирович |
| Доктор медицинских наук, профессор, ГОУ ВПО «Оренбургская государственная медицинская академия Росздрава» | КОНСТАНТИНОВА Ольга Дмитриевна |
Ведущая организация: ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Росздрава»
Защита состоится «7» октября 2009 г. в 12.00 ч. на заседании диссертационного совета Д 208.066.03 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Оренбургской государственной медицинской академии Росздрава» по адресу 460000, г. Оренбург, ул. Советская, 6.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Оренбургской государственной медицинской академии Росздрава».
Автореферат разослан «____» _____________ 2009 г.
| Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор | НЕМЦЕВА Наталия Вячеславовна |
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы
Trichomonas vaginalis является одним из распространенных этиологических факторов вагинита во всем мире. Трихомоноз характеризуется поражением вагинального эпителия и наличием воспалительного процесса (Pindak F.F. et al., 1986; Krieger J.N., 1990). Инфекционное поражение урогенитального тракта у людей отражает высокую специфическую тропность трихомонад к тканям хозяина. Кроме того, трихомонадная инфекция часто сочетается с другими заболеваниями, передаваемыми половым путем (Petrin D. et al., 1998; Schwebke J.R., Burgess D., 2004).
Известно, что трихомоноз нередко сопровождается изменениями в микробиоценозе женского репродуктивного тракта, характеризующимися снижением количества лактофлоры и значительным увеличением количества анаэробных микроорганизмов. Одним из механизмов этого явления рассматривается сдвиг рН вагинального содержимого в щелочную сторону, приводящий к развитию дисбиотических явлений (Дмитриев Г.А., 2003). Исследования последних лет показали, что вагиниты, вызванные T. vaginalis, в большинстве случаев ассоциированы с сопутствующей бактериальной флорой, что позволяет рассматривать трихомоноз как смешанную протозойно - бактериальную инфекцию (Болотова А.А., 2004). Установлено, что в 10-65% случаев трихомоноз протекает по типу транзиторного или бессимптомного носительства и сопровождается значительными изменениями в микробиоценозе урогенитального тракта (Клименко Б.В. с соавт., 2001).
Осложнения у женщин, связанные с трихомонозом, включают различные воспалительные состояния (Cudmore Sarah L. et al., 2004). Совместное действие урогенитальных трихомонад и бактериальной флоры вызывает значительные патологические изменения, которые превосходят простую сумму результатов действия каждого из этих компонентов в отдельности (Клименко Б.В. с соавт., 2001). У большинства больных, перенесших трихомоноз, длительное время остаются воспалительные явления, обусловленные сопутствующей микрофлорой. Описана способность Trichomonas vaginalis фагоцитировать условно-патогенные микроорганизмы, которые способны персистировать в полимембранных фагосомах трихомонад, переживая антибактериальную терапию (Клименко Б.В. с соавт., 2001), что может способствовать их попаданию в верхние отделы женского репродуктивного тракта. В числе факторов, влияющих на воспалительный ответ, отмечена вагинальная микрофлора, сопутствующая инфекции (Schwebke J.R., Burgess D., 2004).
Однако, до настоящего времени не изучены факторы персистенции вагинальной микрофлоры на фоне трихомонадной инфекции и влияние микроэкологических изменений при трихомонозе на характер течения воспалительных заболеваний придатков матки. Поэтому в данной работе проведено сравнительное изучение микроэкологического состояния женского репродуктивного тракта при трихомонадной инфекции, воспалительных заболеваниях и в норме.
Цель и задачи исследования
Цель исследования – определение микроэкологического состояния репродуктивного тракта женщин при трихомонадной инфекции.
Для реализации этой цели были поставлены следующие задачи:
- Определить состояние микробиоценоза влагалища у здоровых женщин, больных трихомонозом и воспалительными заболеваниями придатков матки на основе изучения видового состава и персистентных характеристик выделенных микроорганизмов.
- Исследовать факторы местного иммунитета репродуктивного тракта у женщин группы сравнения, больных трихомонозом и воспалительными заболеваниями придатков матки.
- Оценить влияние микроэкологического состояния и трихомонадной инфекции на характер течения воспалительных заболеваний репродуктивного тракта женщин.
Научная новизна
Впервые на основе инфектологического подхода проведено комплексное исследование микроэкологического статуса у пациенток с трихомонадной инфекцией, включающего таксономическую характеристику вагинального микросимбиоценоза, факторы персистенции микроорганизмов и факторы местного иммунитета репродуктивного тракта женщин.
В вагинальном биотопе определены качественные и количественные изменения видового состава: снижение удельного веса лактобацилл, бифидобактерий и эубактерий, увеличение доли или появление энтеробактерий, коагулазоположительных стафилококков, стрептококков, энтерококков, пептострептококков, пептококков и пропионибактерий.
Аэробные и анаэробные вагинальные штаммы микроорганизмов, выделенных от женщин с трихомонозом и воспалительными заболеваниями придатков матки, характеризовались высокими значениями персистентных характеристик.
Установлены универсальные типы дисбиотических состояний вагинального биотопа у обследованных женщин: дефицит лактофлоры, наличие ассоциативных микроорганизмов с выраженными персистентными характеристиками и бактериальный вагиноз, чаще встречающиеся у больных трихомонадной инфекцией и воспалительными заболеваниями придатков матки по сравнению с женщинами группы сравнения.
У больных с трихомонадной инфекцией определены значительные изменения факторов местной противоинфекционной защиты, характеризующиеся увеличением количества лейкоцитов, лизоцима, С3 компонента комплемента. Выявлено, что бактериальный вагиноз на фоне трихомонадной инфекции проявляется увеличением показателей клеточного и гуморального местного иммунитета, что не является характерным для данного типа микроэкологических изменений вне сочетания с трихомонадной инфекцией.
Установлена высокая распространенность рецидивов и короткие сроки ремиссии у женщин с микроэкологическими нарушениями в репродуктивном тракте, что наиболее выражено проявлялось на фоне трихомонадной инфекции.
Теоретическая и практическая значимость
Полученные в работе данные расширяют представления о патогенетической роли трихомонад в развитии микроэкологических изменений в репродуктивном тракте женщин.
Выявленная связь характера течения воспалительных заболеваний придатков матки с трихомонадной инфекцией и типом микроэкологических изменений позволяет оценивать частоту возникновения рецидивов заболевания и длительности ремиссии в клинике.
Положения, выносимые на защиту
1. Микроэкологические изменения в вагинальном биотопе на фоне трихомонадной инфекции характеризуются наличием микроорганизмов различных таксонов с высокими значениями факторов персистенции и усилением местного иммунитета организма хозяина.
2.Трихомонадная инфекция в сочетании с микроэкологическими изменениями в вагинальном биотопе – основа оценки частоты возникновения рецидивов и длительности ремиссии.
Апробация работы
Основные положения работы были доложены на:
- IV и V Российских научных конференциях «Персистенция микроорганизмов», г. Оренбург, 2003, 2006;
- Российских научных конференциях «Репродуктивное здоровье населения» г. Оренбург, 1999,2001, 2005; г. Челябинск, 2002;
- Международной конференции «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания», г. Москва, 2004 г.
Публикации
По теме диссертации опубликовано 5 работ, в том числе 2 статьи в центральной печати и 3 тезисов.
Объем и структура диссертации
Диссертация изложена на 135 страницах машинописного текста и содержит введение, обзор литературы, описание материалов и методов, 3 главы собственных исследований, заключение, выводы, практические рекомендации и указатель литературы включающий 13 отечественных и 181 зарубежных источников. Работа иллюстрирована 4 таблицами и 20 рисунками.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы исследования
Под наблюдением находились 196 женщин репродуктивного возраста, из них 46 женщин составили группу сравнения, 54 – больные трихомонозом, 52 - больные воспалительными заболеваниями придатков матки (ВЗПМ) и 44 женщины больные трихомонозом в сочетании с воспалительными заболеваниями придатков матки.
В качестве материала для исследования использовали вагинальное отделяемое, которое отбирали из заднего свода влагалища. Исследуемый материал высевали на плотные питательные среды методом секторных посевов. Выделение факультативно-анаэробных микроорганизмов проводили методом секторных посевов в соответствии с рекомендациями Ю.М. Фельдман с соавт. (1984) на Колумбийский агар с 5% крови, желточно-солевой агар, среду Эндо и МРС-агар. Посевы инкубировали при 37оС 24-48 ч. в микроаэрофильных условиях. Для выделения анаэробных микроорганизмов использовали Шедлер-агар с 5% лизированной крови. Посевы инкубировали при 37оС 48-72 ч. в анаэробных условиях с использованием анаэростатов и газогенераторных пакетов.
При выполнении работы было исследовано 720 штаммов микроорганизмов. Все выделенные штаммы идентифицированы общепринятыми методами на основании морфологических, тинкториальных, культуральных и биохимических свойств (Берджи, 1997). Биохимический профиль выделенных микроорганизмов оценивали с помощью коммерческих тест-систем фирмы LACHEMA (Чехия): ENTEROtest, STREPTOtest, NEFERMtest, STAPHYtest, ANAEROtest.
Антилизоцимную и антикомплементарную активности микроорганизмов изучали по описанным методам (О.В. Бухарин с соавт., 1992, 1997). За единицу антикомплементарной активности (антиСН50) принимали активность супернатанта суточной бульонной культуры бактерий исследуемого штамма, которая при контакте 1 мл супернатанта с 1 мл сыворотки обеспечивала инактивацию 1 гемолитической единицы. Антилизоцимную активность микроорганизмов выражали в мкг/млОД.
Диагностику трихомонадной инфекции проводили с использованием микроскопического и культурального методов (Дмитриев Г.А., 2003). Для культурального исследования использовали жидкую питательную среду для выделения трихомонад (ООО НПФ «Диагност-мед», г. Омск). Флаконы со средой и исследуемым материалом инкубировали 4 суток при температуре 370 С затем отбирали осадок, смешивали с 1% водным раствором генцианового фиолетового на предметном стекле, высушивали и микроскопировали. Диагноз трихомоноза ставили на основании наличия в мазке колоний, микроколоний или типичных форм трихомонад.
Факторы местного иммунитета определяли в вагинальном отделяемом: лизоцим – по методике О.В. Бухарина с соавт. (1990), количество SIgA, S com, IgG, IgM, IgA, IgE, C3 компонента комплемента, лактоферрина – методом иммуноферментного анализа с использованием наборов реактивов «ИФА- С3» ООО «Цитокин». г. Санкт-Петербург; «Лактоферрин – стрип», “IgE - ИФА – Бест – стрип “ ЗАО «Вектор – Бест» г. Новосибирск; наборы реагентов для определения концентрации секреторного IgA, IgG, IgM, IgA, Scom, ООО «Полигност» г. Санкт-Петербург. Общее количество лейкоцитов и нейтрофилов подсчитывали в камере Гаряева общепринятым методом. Полученные результаты анализировали с применением параметрических методов статистики (Лакин Г.Ф., 1990). Достоверность полученных различий между средними величинами групп определяли при помощи вычисления средней ошибки разности, степень достоверности – по таблице Стьюдента-Фишера. В качестве минимально допустимого использовали уровень значимости р<0,05. Способ прогнозирования рецидивов воспалительных заболеваний придатков матки разрабатывали с расчетом коэффициентов информативности и диагностических коэффициентов на основе использования «неоднородной последовательной процедуры распознавания образов» (Гублер Е.В., Генкин А.А., 1973).
Результаты исследования и их обсуждение
Исследования видового состава вагинальной микрофлоры выявили, что для трихомонадной инфекции характерны изменения микробиоценоза, схожие с состоянием микрофлоры при вагинальном дисбиозе у женщин с воспалительными заболеваниями придатков матки, сопровождающиеся увеличением видового разнообразия, появлением и/или увеличением доли микроорганизмов, несвойственных для вагинального биотопа, и элиминацией или снижением доли автохтонной составляющей микробиоты (Рис. 1, 2). Так, доля лактобацилл в спектре аэробной микрофлоры снижалась с 38,5% у здоровых до 33,2% у женщин с воспалительными заболеваниями придатков матки, 24,2%- с трихомонадной инфекцией и 25,2% у женщин с трихомонозом и воспалительными заболеваниями придатков матки. Содержание коринебактерий также уменьшалось и составило 8,5% в группе с воспалительными заболеваниями придатков матки, 9,2% при трихомонозе и 11,8% в группе с трихомонозом и ВЗПМ по сравнению с 15,4% штаммов, выделенных от здоровых. Вместе с тем происходило увеличение доли энтеробактерий и коагулазоположительных стафилококков у женщин с трихомонадной инфекцией
соответственно до 13,5% и 5,7%, у женщин с ВЗПМ до 12,9% и 2,2%, у женщин с трихомонозом и ВЗПМ до 10,1% и 6,7% по сравнению со здоровыми, у которых удельный вес этих микроорганизмов составил - 3,1% и 1,5%. Отмечено увеличение доли энтерококков у женщин с трихомонозом (11,3%) и у женщин с трихомонозом и ВЗПМ (14,3%), по сравнению со здоровыми (7,7%), тогда как у женщин с ВЗПМ доля этих микроорганизмов составила 5,6%. Были выявлены изменения и в анаэробной составляющей микробиоценоза (Рис. 2). Так, доля эубактерий и бифидобактерий в норме составляла 50,0% и 15,0%, при трихомонозе, при воспалительных заболеваниях, при трихомонозе и воспалительных заболеваниях отмечена элиминация бифидобактерий, и снижение доли эубактерий до 22,8%, 44,8% и 5,6% соответственно. В спектре анаэробной микрофлоры у женщин с трихомонозом, ВЗПМ, с трихомонозом и ВЗПМ отмечено появление пропионибактерий, доля которых составила соответственно 18,2% и 6,9% и 22,2%, пептококков – 13,6%, 3,5% и 5,6%, пептострептококков – 13,6%, 6,9% и 16,7%. Бактероиды в структуре анаэробных микроорганизмов вагинального биотопа занимали существенный удельный вес, который составил у женщин группы сравнения – 25,0%, у женщин больных трихомонозом – 18,2%, у женщин с ВЗПМ 34,4%, а у женщин больных трихомонозом и ВЗПМ – 38,8%. Доля фузобактерий была наибольшей у женщин с трихомонадной инфекцией (13,6%) и у женщин с трихомонадной инфекцией в сочетании с ВЗПМ (11,1%), у здоровых этот показатель составил 10,0%, а у больных ВЗПМ 3,5%.
Таким образом, видовой состав вагинального микробиоценоза у женщин с микроэкологическими нарушениями и трихомонадной инфекцией по сравнению со здоровыми характеризовался уменьшением частоты выделения лактобацилл и коринебактерий, увеличением количества изолированных коагулазоположительных стафилококков и в значительной степени энтеробактерий. В видовой структуре анаэробной вагинальной микрофлоры изменения были связаны с элиминацией бифидобактерий и уменьшением количества эубактерий. Частота выделения фузобактерий увеличивалась, а также наблюдалось появление среди изолятов пропионибактерий и анаэробных кокков (пептококков и пептострептококков).
Изучение факторов персистенции (антилизоцимной и антикомплементарной активностей) микроорганизмов (Рис. 3, 4), изолированных у женщин обследуемых групп, выявило значительное увеличение выраженности признаков при трихомонадной инфекции и воспалительных заболеваниях придатков матки. Были обнаружены достоверно более высокие средние значения АЛА 0,24-0,85 мкг/млОД и АКА 2,8-12,2 антиСН50 у штаммов стафилококков, стрептококков, энтерококков, энтеробактерий и коринебактерий, выделенных от женщин с трихомонадной инфекцией, с воспалительными заболеваниями придатков матки и с трихомонозом в сочетании с воспалительными заболеваниями придатков матки по сравнению с микроорганизмами, изолированными от здоровых, где эти показатели составили соответственно 0,22-0,34 мкг/млОД и 2,1-3,7 антиСН50. Аналогичные изменения наблюдались и в анаэробном звене микробиоты. Штаммы бактероидов, фузобактерий и эубактерий, выделенные от женщин группы сравнения, обладали менее выраженными персистентными характеристиками (АЛА 0,03-0,25 мкг/млОД, АКА 1,7-3,8 антиСН50) по сравнению с таковыми у штаммов от женщин с трихомонозом, ВЗПМ и с трихомонозом в сочетании с ВЗПМ (АЛА 0,1-0,95 мкг/млОД, АКА 4,5-14,2 антиСН50).
Проведенные исследования позволили установить характер микроэкологических изменений в вагинальном микробиоценозе при трихомонадной инфекции, который заключается в снижении количества лактофлоры, увеличении видового богатства микрофлоры, увеличении доли анаэробных микроорганизмов и повышении персистентного потенциала вагинальной микрофлоры.
Анализ изменений видового состава и биологических свойств микроорганизмов, изолированных у обследованных женщин, позволил выделить 4 типа вагинального микробиоценоза (Табл. 1) (2-4 типы рассматривали как варианты дисбиотических состояний): 1. соответствует нормальному состоянию,
характеризуется достаточным количеством лактофлоры и низкими значениями факторов персистенции условно- патогенных микроорганизмов;
2. микробиоценоз, характеризующийся дефицитом лактофлоры и наличием условно-патогенных микроорганизмов с низкими значениями факторов персистенции; 3. микробиоценоз, характеризующийся высокими значениями факторов персистенции условно-патогенных микроорганизмов на фоне нормального или низкого содержания лактобацилл; 4. бактериальный вагиноз, как особый тип микроэкологических нарушений.
Табл. 1 - Характеристика микробиоценоза влагалища обследованных женщин
| Характеристика микробиоценоза | Женщины группы сравнения (без трихомоноза), n = 46 | Больные трихомо-нозом, n = 54 | Больные ВЗПМ, n = 52 | Больные трихомоно-зом и ВЗПМ, n = 44 |
| 1. Состояние вагинального микробиоценоза, соответствующее нормальному | 50,0% (23) | 13,0%* (7) | 7,7%* (4) | 4,5* (2) |
| 2.Дефицит лактофлоры без увеличения количества анаэробных микроорганизмов | 34,8% (16) | 24,1%* (13) | 17,3%* (9) | 9,1* (4) |
| 3. Наличие УПМ с выраженными персистентными характеристиками | 8,7% (4) | 38,8%* (21) | 67,3%* (35) | 59,1* (26) |
| 4.Бактериальный вагиноз | 6,5% (3) | 24,1%* (13) | 7,7% (4) | 27,3* (12) |
* - р 0,05 по отношению к данным группы сравнения
Из представленных данных следует, что трихомонадная инфекция как, воспалительные заболевания придатков матки и трихомоноз в сочетании с воспалительными заболеваниями придатков матки сопровождались достоверным снижением частоты встречаемости нормального состояния микробиоценоза до 13,0%, 7,7% и 4,5% соответственно по сравнению с 50,0% у здоровых. Одновременно с этим наблюдалось увеличение частоты выделения условно-патогенных микроорганизмов с выраженными персистентными свойствами с 8,7% у женщин группы сравнения до 38,8% у больных трихомонозом, 67,3% у больных ВЗПМ и 59,1% у больных трихомонозом и ВЗПМ. Кроме того, было выявлено увеличение доли пациенток с бактериальным вагинозом до 24,1% при трихомонадной инфекции, до 7,7% при ВЗПМ и до 27,3% при трихомонозе и ВЗПМ по отношению к 6,5% в группе сравнения. Вместе с этим процент женщин с дефицитом лактофлоры среди больных трихомонозом (24,1%), больных ВЗПМ (17,3%) и больных трихомонозом в сочетании с ВЗПМ (9,1%) был ниже, чем процент женщин с дефицитом лактофлоры в группе сравнения (34,8%).
Анализ состояния факторов местного иммунитета (Табл.2) у больных с трихомонозом, воспалительным процессом в придатках матки и трихомонозом в сочетании с ВЗПМ показал, что количество лейкоцитов в цервикальной слизи составило соответственно 19,4109/л, 12,8109/л и 18,5109/л, это в 2-3 раза выше по сравнению со здоровыми женщинами, у которых данный показатель был равен 5,9109/л. На этом фоне увеличилось абсолютное количество нейтрофилов в цервикальном секрете, возросшее в 2,5-3 раза, а также отмечено повышение относительного содержания нейтрофилов до 84,6% при трихомонозе, 73,6 % при ВЗПМ и 81,3% при трихомонозе и ВЗПМ по сравнению с 61,2% у здоровых женщин. У женщин больных трихомонозом, ВЗПМ, трихомонозом в сочетании с ВЗПМ отмечено возрастание гуморальных факторов защиты репродуктивного тракта: лактоферрина, лизоцима, С3 компонента комплемента, иммуноглобулинов и секреторного компонента.
Как видно из представленных результатов, трихомонадная инфекция вызывает выраженную реакцию со стороны клеточных и гуморальных факторов местной защиты, сопоставимую с таковой при воспалительных заболеваниях придатков матки. Выявлено абсолютное и относительное увеличение количества нейтрофилов в пуле лейкоцитов вагинального биотопа.
Табл. 2 - Характеристика факторов местного иммунитета вагинального биотопа обследованных женщин
| Факторы местного иммунитета | Группы обследованных женщин | |||
| Группа сравнения, n = 46 | Больные трихомонозом, n = 54 | Больные ВЗПМ, n = 52 | Больные трихомонозом и ВЗПМ, n = 44 | |
| Кол.лейкоц, 109/л | 5,9±0,2 | 19,4±0,9 | 12,8±0,7 | 18,5±1,0* |
| К-во нейтрофилов, 109/л | 3,61±0,2 | 13,9±0,8 | 8,4±1,0 | 14,5±0,9* |
| К-во нейтрофилов, % | 61,2±2,3 | 84,6±2,4* | 73,6±6,1* | 81,3±3,6* |
| Лактоферрин, мкг/мл | 897,8±102,4 | 2268,5±97,2 | 2051,2±128,2 | 2171,6±169,7* |
| Лизоцим, мкг/мл | 26,1±1,9 | 37,2±2,7 | 33,3±2,1* | 36,2±2,5* |
| С3 комп. комплем, мкг/мл | 29,7± 2,5 | 31,1±1,1 | 35,1±2,1 | 32,0±1,6 |
| sIgA, мг/мл | 0,126±0,014 | 0,136 ±0,098 | 0,195±0,02 | 0,144±0,035 |
| Scom, мг/мл | 0,066±0,008 | 0,077 ±0,007 | 0,103±0,003 | 0,091±0,008* |
| IgA, мг/мл | 0,24±0,012 | 0,523±0,021 | 0,624±0,078 | 0,495±0,062* |
| IgM, мг/мл | 0,112 ±0,011 | 0,217±0,016 | 0,472 ±0,014 | 0,512±0,059* |
| IgG, мг/мл | 2,16±0,14 | 4,69±0,46 | 2,96±0,17 | 3,42±0,31* |
| IgE, МЕ/мл | 20,1±1,3 | 23,6±2,1 | 31,2±1,9 | 25,7±1,4* |
* p0,05
Дополнительными данными о состоянии местного иммунитета послужили результаты оценки вагинальных мазков у женщин с трихомонадной инфекцией. Было выявлено несколько типов микроскопической картины. Они характеризовались наличием или отсутствием морфотипов лактобацилл, представителей ассоциативной микрофлоры, типичной микроскопической картиной бактериального вагиноза. Причем описанные характеристики вагинального мазка можно было наблюдать как на фоне лейкоцитарной реакции, так и при её отсутствии.
Известно, что трихомонадная инфекция характеризуется лейкоцитозом поскольку врожденный иммунитет, включающий хемотаксис и ограниченный выход нейтрофилов, может быть более важным в контроле за трихомонадной инфекцией, чем приобретенный иммунитет (Wlner-Hanssen P. et al., 1989). Вместе с тем отсутствие лейкоцитарной реакции не противоречит данным о существовании вялотекущих бессимптомных форм трихомоноза, сложных для диагностики (Дмитриев Г.А., 2003). Приблизительно половина женщин с трихомонозом не имеют симптомов заболевания. Следовательно, если эти женщины не обращаются к врачу, диагноз может быть не поставлен (Schwebke J.R., Burgess D., 2004).
Известно, что бактериальный вагиноз, как один из типов микроэкологических нарушений, характеризуется отсутствием лейкоцитарной реакции, являющейся одним из диагностических признаков данного дисбиоза вагинального биотопа. Учитывая высокую распространенность бактериального вагиноза на фоне трихомонадной инфекции и выраженную реакцию факторов местного иммунитета у женщин данной группы, а также исходя из полученных результатов микроскопии вагинальных мазков, свидетельствующих о наличии лейкоцитоза при бактериальном вагинозе, что не характерно для указанного варианта дисбиоза, мы в дальнейшем предприняли попытку дать характеристику факторов местного иммунитета обследованных женщин с бактериальным вагинозом.
Бактериальный вагиноз в сочетании с трихомонадной инфекцией характеризовался увеличением показателей как клеточного, так и гуморального местного иммунитета при сопоставлении с аналогичными показателями у женщин группы сравнения и больных ВЗПМ.
В результате, проведенные исследования по изучению местного иммунитета при трихомонадной инфекции выявили увеличение клеточных и гуморальных факторов естественной резистентности, выраженность которых была определена и при бактериальном вагинозе, что не является характерным для данного типа микроэкологических изменений вне сочетания с трихомонадной инфекцией.
На следующем этапе исследований нами была выявлена связь между характером течения воспалительных заболеваний придатков матки на фоне трихомонадной инфекции и без неё. Были установлены частота и сроки возникновения рецидивов эндометрита у женщин с различными типами вагинального микробиоценоза.
Отмечено, что рецидивы чаще возникали у женщин с микроэкологическими нарушениями как на фоне трихомонадной инфекции, так и без трихомоноза (Рис.5). У женщин с микросимбиоценозом, соответствующем норме, рецидивы воспалительных заболеваний придатков матки с трихомонадной инфекцией и без трихомоноза были зарегистрированы соответственно в 62,5% и 33,3% случаев, у женщин с дефицитом лактофлоры в 77,3% и 64,0%, при наличии бактерий в вагинальном биотопе с выраженными факторами персистенции у 71,0 и 60,0 % женщин и с бактериальным вагинозом у 87,5% и 50,0% женщин. Следует отметить преобладание частоты рецидивов воспалительных заболеваний придатков матки на фоне трихомонадной инфекции.
Кроме того, была проанализирована длительность ремиссии воспалительных заболеваний придатков матки у обследованных женщин (Рис.6). Самая длительная ремиссия заболевания была отмечена у женщин, с вагинальным микросимбиоценозом соответствующим норме, с трихомонадной инфекцией – 11,6 мес., и без протозойной инвазии – 17,5 мес. У женщин с дисбиотическими состояниями вагинального микросимбиоценоза сроки ремиссии значительно сокращались и составили на фоне трихомоноза и при его отсутствии соответственно: с дефицитом лактофлоры - 8,4 и 11,3 мес., с наличием в вагинальном биотопе микроорганизмов с выраженными факторами персистенции - 8,2 и 12,2 мес. и с бактериальным вагинозом – 7,1 и 14,5 мес. Было установлено, что частота рецидивирования воспалительных заболева-
ний придатков матки возрастала у женщин с микроэкологическими нарушениями на фоне трихомонадной инфекции.
Полученные материалы позволили разработать способ прогнозирования воспалительных заболеваний придатков матки, основанный на расчете диагностических коэффициентов информативных микроэкологических показателей, включающих: наличие микроорганизмов, нетипичных для биотопа, ПМО лактобацилл, ПМО условно-патогенных микроорганизмов, АЛА, АКА, наличие трихомонад, грибов рода Candida, ключевых клеток и сроки клинического улучшения от проводимого лечения.
Оценивая результаты выполненной работы, следует выделить два основных момента:
Трихомонадная инфекция характеризуется изменением ассоциативного симбиоза репродуктивного тракта женщин, проявляющимся дефицитом доминантной микрофлоры, увеличением персистентных характеристик ассоциативной микрофлоры и усилением местного иммунитета организма хозяина.
Микроэкологические изменения в вагинальном биотопе в сочетании с трихомонозом являются факторами рецидивирования воспалительных заболеваний придатков матки.
Выводы
- У пациенток с трихомонадной инфекцией в вагинальном биотопе отмечено снижение удельного веса лактобацилл, бифидобактерий и эубактерий, увеличение доли или появление энтеробактерий, стрептококков, энтерококков, пептострептококков, пептококков и пропионибактерий.
- Аэробные и анаэробные микроорганизмы, выделенные из влагалища женщин с трихомонадной инфекцией, характеризовались высокими значениями персистентных характеристик (антилизоцимной и антикомплементарной активностей) бактерий.
3. Трихомонадная инфекция способствует развитию дисбиотических состояний вагинального биотопа, характеризующихся дефицитом лактофлоры, наличием аллохтонных микроорганизмов с высокими значениями факторов персистенции, а также изменениями по типу бактериального вагиноза.
4. У больных с трихомонадной инфекцией (по сравнению со здоровыми женщинами) наблюдаются значительные изменения факторов местной противоинфекционной защиты, проявляющиеся увеличением количества лейкоцитов, лизоцима, С3 компонента комплемента и иммуноглобулинов.
5. Выявлено, что бактериальный вагиноз на фоне трихомонадной инфекции протекает с лейкоцитарной реакцией, которая не характерна для данного типа дисбиоза.
6. Трихомонадная инфекция в сочетании с микроэкологическими изменениями в вагинальном биотопе является фактором рецидивирования воспалительных заболеваний придатков матки, приводя к сокращению сроков ремиссии и увеличению частоты рецидивов. Разработан способ прогнозирования воспалительных заболеваний придатков матки, основанный на расчете диагностических коэффициентов информативных микроэкологических показателей.
Список работ, опубликованных по теме диссертации
- Роль биологических свойств вагинальных лактобацилл в процессах колонизации / С.В. Черкасов, Т.М. Забирова, А.В. Сгибнев, И.В. Черкасов // Журн. микробиол., 2003, №4, С. 61-64.
- Биологические свойства лактобацилл биотопов человека в норме и при дисбиозах /С.В. Черкасов, Т.М. Забирова, А.В. Сгибнев, И.В. Черкасов //Сб. материал. междунар. конф. «Пробиотики, пребиотики, синбиотки и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы». Москва, 2004, С. 36-37.
- Забирова Т.М. Комплексная характеристика микроэкологического статуса репродуктивного тракта женщин при трихомонадной инфекции /Т.М. Забирова, И.В. Черкасов //Вестник Оренбургского государственного университета, 2006. № 13. С. 230
- Черкасов И.В. Состояние факторов естественной резистентности репродуктивного тракта женщин при трихомонадной инфекции / И.В. Черкасов // Вестник Оренбургского государственного университета, 2006. № 13. С. 297-298
- Характеристика вагинального микробиоценоза при трихомонадной инфекции /И.В. Черкасов, Т.М. Забирова, Е.В. Лешина, С.В. Черкасов //Журн. микробиол., 2006. № 4. С. 97-100
ЧЕРКАСОВ Игорь Викторович
Характеристика микробиоценоза репродуктивного тракта женщин
при трихомонадной инфекции
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
кандидата медицинских наук
Оригинал макет изготовлен в программе MICROSOFT WORD 7.0. for Windows. Подписано в печать 28.08.2009 г. Отпечатано формат 6084 1/16. Усл. печ. л. 1,0. Печать оперативная, гарнитура Таймс. Тираж 100 экз.
